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感 染 症学 雑 誌

第52巻

第11号

緑 膿 菌 感 染 防 禦 に 関 す る研 究 特 にOEP特

異 抗 体 を 指 標 と して … そ の2

静 注 用 γ-Globulin製

剤 のLot別

抗 体 価 の 含 有 差 と,マ

に よ るOEP-HA ウ ス緑 膿 菌

感染 症 治療 実験 効果 との関連 東 京大学医科学研 究所 Sloan-Kettering

Institute

for

Cancer

原

中

Research

勝

信子

松尾

峰子

.S.A.)客

員 研 究 員 出 張 中

征

東京大学医科学研究所 里見

内科 (U

内科

深谷

一太

国井

乙彦

前東 京大学医科 学研究所 内科教授 現東京厚生年 金病院 真

Key

words:

Pseudomonas

総

下

病院長

啓

明

Gamma-globulin products, OEP-HA titer, Curative effectiveness

aeruginosa,

括

も 著 明 な 効 果 が 得 られ た が,Apacillin

緑 膿 菌 感 染 症 の 治 療 に 市 販Gamma

Giobulin

は0.025mg投

(APPC)で

与 群 で 相 乗 効 果 が 現 わ れ た.γ-G1

製 剤 の製 品 の差 異 に よ る 有 効 性 の 有無 を 検 討 す

製 剤 と こ の 両 抗 生 物 質 の 併 用 例 で は,GM単

る た め に 次 の 実 験 を 行 つ た.静

用 と ほ ぼ 同 じ結 果 が 得 られ,二

Globuiin(以

下

γ-G1と 略 す)製

LotのOEP-,Elastase-,お を 測 定 し,各

注 用Gamma 剤2社3製

品53

よ びProtease-HA価

B社2製

剤 がA社

た.Elastase-HA,

用 菌 がProtease,

と

ク ロフ ァ ー ジ の

の マ ウス 腹 腔 内 注 入

感 染 に 対 す る治 療 効 果 を み る と,OEP-HA価

aeruginosa た,Elastase

体 の 感 染 防 禦 に 対 す る効 果 は 本 実 験 使 Elastase非

産 生 株 の た め か,明

緒 言 お よび 目的 γ-G1製 剤 が 種 々 の 起 炎 菌 に よ る 重 症 感 染 症 に

製剤を用い て

aeruginosa NC-5株

aerugi-

瞭 で は な か つ た.

γ-G1製 剤 の 作 用 は そ

の 力 価 に 比 例 し て い た.OEP-HA

の 力 価 とP.

に 対 す る 感 染 防 禦 力 とは 比 例 し た.ま Protease抗

価 ×4,×16,×32,×64,×128の Pseudomonas

共 通 抗 原(OEP)のHA価

Protease-HAのOEP-HA価

緑 膿 菌 食菌 能 に 及 ぼ す のOEP-HA価

は

製 剤 に比 べや や 高力価 を 示 し

の 相 関 は 認 め られ な か つ た.マ

種 製 剤 は 共 にP.

nosaに 対 す る 非 特 異 的 効 果 は 認 め ら れ ず ,緑 膿 菌

々 の製 剤 別 に よる治 療 効果 を マ ウス

緑 膿 菌 感 染 実 験 を 行 い 検 討 し た.OEP-HA価

め られ な か つ た.γ-G1三

独併

者 併用 の 意 味 は認

と

有 効 で あ る と い う報 告 は 多 い.こ

の場 合

γ-G1療

法 は個 体 の持 つ 宿 主 防 禦 力 の作 用 を 補 うもの で あ ろ う と考 え ら れ る1).こ

の 有効性 は 製剤 中の 主

相 関 し た.γ-G1製

剤 と抗 生 剤 と の 併 用 実 験 を 行

に特 異 抗 体 に よる もの で あ る と 考 え られ て い る

つ た がGentamicin

(GM)使

が,非

用 例 で は5μg併

用 で最

特 異 的 感 染 防 禦 作用 の存 在 も考 え られ て い

491

昭 和53年11月20日

る2).わ

が 国 に お け る γ-G1製 剤 の 国 家 検 定 に

は,γ-G1量

と ジ フ テ リ ア,麻

疹,破

和 抗 体 量 は 検 査 さ れ て い る が,他

(5)

傷風等 の中

の 病 原微 生 物 に

対 す る抗 体 量 は 調 べ られ て い な い.従 重 症 感 染 症 に 用 い ら れ る 場 合,そ

は そ れ ぞ れ,1.6μg/ml,

つ て 臨床 上

の原因の細菌 ま

近宿主抵

抗 力 減 少 時 に お け る グ ラ ム陰性 桿 菌 感 染 症 が増 加

あ つ た.

赤 血 球 凝 集 反 応(HA):OEP-,Elastase-

Protease-HAは

本 間 等 の 方 法 に 従 い,タ

ンニ ン酸

処 理 感 作 羊 赤 血 球 を 用 いMicrotitration

method

で 施 行 し た5)-7). (6)

た は ウ ィ ル ス に 対 す る特 異 抗 体 の 含 量 が 測 定 さ れ ず に 用 い られ て い る の が 現 状 で あ る.最

12.5μg/mlで

抗 体 の125Iラ

10-3M

ICIを

mci入

れ4℃,

ベ ル:飽

和 食 塩 水 に8.O×

溶 解 し そ の1ml中

に,Na

125Iを20

12時 間 ス タ ー ラ ー に て 撹 伴 し,こ れ

し,そ

の なか で最 も難 治 な 感染 症 の 原 因菌 の一 つ

を 抗 体 含 有 溶 液 に 微 量 ず つ 徐 々 に 加 え て4℃

にP.

aeruginosaが

撹 伴 を 行 つ た.Sephadex

い る3)4).γ-Gl製

あ り,そ

の増 加 が 報 告 され て

剤 は 製 法 に よ り生 体 内 半 減 期,抗

補 体 作 用 等 に そ れ ぞ れ 特 徴 が あ る1).こ はPepsin処

理,Plasmin処

leneglycol処

理 の3製

の 実験 で

aeruginosaの

(1)

γ-G1製 剤 のLot別

(2)

のOEP-,Elastase-

体価

125Iラ ベ ル

(7)

た.す

よ るマ ウス脾 由来 マ

地 中 に 遊 離 し た 後,200meshス

レス 網 を 通 し,シ ャ ー レ内 で10%

浮 遊 さ せ た.37℃, て,同

γ-G1製 剤 とGM,

APPCと

の併 用 に よ

rpm

を 用 い た.す 処 理30Lot,

注 用 γ-G1製 剤2社3製

な わ ちPepsin処

品53Lot

Polyethyleneglycol処

細 菌:当

さ れ たP.

理6Lotで

ジ ョ ン培 地37℃,

あ

より分与

の ハ ー トイ ン フ ユ ー

18時 間 培 養 菌 を 用 い た.本

Elastase, Protease非

産 生 株 で あ る.実

に 対 す るLD50は3.4×103

(4%ム

株 は

験 マ ウス

チ ン 浮 遊 液)

で あ る. (3)

rpm

2,000

洗 浄 し た 細 胞 を 実 験 に 供 し た. あ つ た9).

マ ク ロフ ァ ー ジ食菌 能 に 及 ぼ す

ベ ル γ-Gl, P. aeruginosa NC-5株,マ よび補 体 を振 盤 培 養 器

2時 間 反 応 さ せ4℃,

20分)洗

浄 後,γ-counterに

3回 遠 心(1,500 てisotope量

を

(9) 与:γ-G1製

実 験 的 緑 膿 菌 感 染 に お け る γ-G1の 剤 を マ ウ ス 一 匹 当 り0.5mg

を 皮 下 投 与 し た.投

与6時

間 後 に4%ム

P. aeruginosa NC-5株

を 混 和 し て,LD50量

量 の 菌 量 を 腹 腔 内 投 与 し,マ

投

(17mg/kg) チ ン中 に の100倍

ウ ス の 生 死 を4日

間

観 察 し た12)。 動 物:ddY

strain 4週 齢 雄 マ ウ ス を 用 い

(10)

抗 生 物 質 の 投 与:GMお

各 単 独 投 与,併

た. (4)

清 を捨

リコ ン ゴ ム

測 定 し た10)11).

研 究所 菌株 保 存 施設

aeruginosa NC-5株

199培 養 液 に 再

繰 り返 し た.シ

ウ ス 脾 マ ク ロ フ ァ ー ジ,お に て, 37℃,

理17Lot,Plasmin

用 前 添 付 溶 解 液 に て 溶 解 した.

(2)

γ-G1の

影 響:125Iラ

材 料 と方 法

る.使

20分 に て3回

(8)

で あ る.

γ-Gl:静

含 むTC

60分 に 静 置 し た 後,上

様 の 操 作 を3度

大 単 核 細 胞 は 約90%で

る実 験 感 染 治 療 効果

(1)

芝 製)を

テン

fetal calf serum

で 細 胞 を 剥 離 し 同 培 養 液 に 再 浮 遊 さ せ4℃,

含 有 量 と治 療 効 果 と の 関 係 (4)

ウス脾 よ

法 に よ る 附 着 法 に よ り細 胞 を 分 離 し

との相 関 の有 無

HA価

分 離 した.

な わ ち 低 温 に て ピ ン セ ッ トを 用 い て 脾 細 胞

お よび 補 体(東

実 験 感 染 症 に お け る γ-G1製 剤 のOEP-

Buffer Solution,

マ ク ロ フ ァ ー ジ の 分 離:ddYマ

ク ロ フ ァ ー ジ 緑 膿 菌 食 菌 能 の 測 定 とOEP-HA価

(3)

Borate

合 部 と残 余125Iを

法 に 従 つ た8).

をTC-199培 γ-G1に

G25(ColumnO・8×35cm

オ ン 強 度0.16, 用 い て,結

りMosier変

感 染 防 禦 に 対 す る作 用 を 次 の 観 点 か ら検 討 し た.

Protease-HA抗

4℃)を

McFarlane変

理 お よびPolyethy-

剤 に つ い てP.

pH8.0,イ

にて

抗 生 物 質:GM,

P. aeruginosa NC-5株

APPCを

使 用 し た.

に 対 す る 最 小 阻 止 濃 度(MIC)

用 投 与,お

照 の 各 群 に つ い て,γ-G1製

よ びAPPCの

よび 抗 生 物 質 非 投 与 対 剤 使 用 群OEP吸

群 に わ け て 効 果 を 検 討 し た.γ-G1は

収

菌 腹 腔 内投

492

感 染 症学 雑 誌

与 前6時

間 に1.25mg/mouse

(42mg/kg)を

与 し,GMは

菌 腹 腔 投 与 と 同 時 に50,

0.5μg/mouse

(1.67,

0.167お

皮 下 注 射 し た.APPCは 2.5,

0.25,お

投 与 は1日2回

菌 腹 腔 投 与 後2時 (83.3,

皮 下 注 射 し た13).抗 行 つ た.(註:こ

群 と異 な つ たmucinを

結

よび

(1)

よ び0.0167mg/kg)

よ び0.025mg/mouse

よ び0.833mg/kg)を

皮下投 5,お

社Plasmin処

8.33お

Pepsin処

の群 の実 験 は 前

使 用 し た た め,γ-G1投

1

Distribution (53

of lots)

OEP-hemoagglutinin for

intravenous

■ ■ ■

体 価 はB

理 製 剤 が 高 力 価 の も の が 多 く,

titer

for

理 製 剤,A社

理 製 剤 の 順 で あ つ た .(A及

Protease-HA抗

与

く,有

products

体 価:OEP-HA抗

剤 問 で 統 計 上 有 意 差 あ り)(Fig.

量 も 変 化 し た.) Fig.

果

次 い でB社Polyethyleneglycol処

生物質 の

Pepsin

B.co

Plasmin

B.co

Polyethyleneglycol

製

体 価 は 両社 各 製 剤 と もに変 動 が多

意 差 は 認 め られ な か つ た.OEP-HA価 three

びB社

1) Elastase-HA

kinds

of ƒÁ-globulin

use.

A.co

第11号

γ-G1製 剤Lot別OEP-,Eiastase-,お

よ びProtease-HA抗

間 で

第52巻

treated treated treated

Fig.2 Phagocytic reaction of macrophage aginst Pseudomonas aeruginosaNC-5 strainafter120 minutes incubation with the materials listedand then were counted by gamma counter.-1-means range arithmetic mean. Stastically significantdifferencebetween A and C, A and D, B and C, C and D (p