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Abb. 1

Zyklus d e r P o l y m e r a s e - K e t t e n r e a k t i o n . N a c h d e n drei Schritten

D e n a t u r i e r u n g , H y b r i d i s a t i o n (»Anbinden« v o n z w e i S t a r t e r n a n d e n E n d e n d e r G e n s e q u e n z ) u n d P o l y m e r i s a t i o n s i n d z w e i doppelstränglge DNA-Moleküle e n t s t a n d e n . Weitere Zyklen bewirken eine exponentlelle A n r e i c h e r u n g d e s gewünschten G e n s e g m e n t s .

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Beispiele einer S e q u e n z a n a l y s e eines Gens u n m i t t e l b a r n a c h In-vitro-

A m p l i f i k a t i o n d u r c h d i e P o l y m e r a s e - K e t t e n r e a k t i o n (»direktes Sequenzieren«), Dargestellt ist e i n A u s s c h n i t t d e r N u c l e o t i d - S e q u e n z d e s Gens, d a s d i e m e n s c h l i c h e D i h y d r o f o l a t r e d u k t a s e (die d u r c h M e t h o t r e x a t i n h i b i e r t w i r d ) kodiert. Oben: manuelles Sequenzleren mit radioaktiv markierten Nucleotiden. Unten: automatisches Sequenzleren mit fluoreszierenden farbigen Primern (Applied Biosystems).

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[Gene amplification by the polymerase chain reaction].

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