709

呼 吸器 病 原 性 ブ ランハ メ ラ ・カ タ ラー リスLPSの 呼 吸器感 染 症 患者 血 清 中抗LPS抗

生化 学 的 分析 と

体 の役 割

長崎大学熱帯医学研究所内科 田中

宏史

大石

和徳

苑田

文成

岩垣

明隆

永武

毅

松本

慶蔵

Key

words:

(平成4年1月8日

受 付)

(平成4年2月14日

受 理)

Branhamella anti-LPS

catarrhalis, antibody,

要

serum

lipopolysaccharide, sensitivity

旨

呼 吸 器 病 原 性 プ ラ ン ハ メ ラ ・カ タ ラ ー リス 由 来 のlipopolysaccharide(LPS)の さ ら に 本 菌 に よ る呼 吸 器 感 染 症 に お け る ヒ ト抗LPS抗 ラ ー リス のLPSは0-chainを と し て 認 め られ た.ま

体 の 役 割 に つ い て 検 討 し た.ブ

持 た な いIipo-oligosaccarideで

た,SDS:PAGEパ

生 化 学 的 分 析 を 行 い, ラ ン ハ メ ラ ・カ タ

あ り,分 子 量 約3KDaの2∼4の

バ ン ド

タ ー ン は 菌 株 間 で 異 な っ て お り,均 一 性 は認 め られ な か っ た.

ブ ラ ソ バ メ ラ ・カ タ ラ ー リス に は 本 菌 呼 吸 器 感 染 症 の 回 復 期 患 者 血 清 に よ り抗 体 依 存 性 の補 体 溶 菌 を 示 す 株(87-122株)と,回

復 期 患 者 血 清 に 溶 菌 を 受 け な い 株(88-23株)が

認 め ら れ た 抗 体 依 存 性 補 体 溶 菌 に は 抗LPS特 LPS特

ら に,87-122株

で

異 抗 体 が 関 与 し て い た.以 上 の 成 績 か ら,抗 ブ ラ ソバ メ ラ

異 抗 体 は 本 菌 呼 吸 器 感 染 症 に お け る感 染 防 御 の 一 役 を 担 う こ と が 示 唆 され た.

序

ら構 成 され て お り,感 染 宿 主 に 対 し て は エ ン ド ト

文

ブ ラ ン ハ メ ラ ・カ タ ラ ー リ ス は 呼 吸 器,耳

鼻科

領 域 感 染 症 に お け る 主 要 な 起 炎 菌 で あ る.特

に近

年,臨

存 在 した.さ

床 分 離 株 の β-ラ ク タ マ ー ゼ 産 生 株 が 注 目 を

集 め て お り1)2),ま た 敗 血 症3),細

菌 性 心 内 膜 炎4)等

の 起 炎 菌 と し て も 報 告 さ れ て い る.し

か し,本

菌

感 染 症 の 炎 症 の メ カ ニ ズ ムに 関 す る研 究 は これ ま で に わ ず か に す ぎ ず,一

部 ヒ ト血 清 の 抗 体 価 を 菌

体 を 用 い て 測 定 し た 報 告5)や,外 lipopolysaccharide(以

膜 蛋 白6),外

下LPS)7)のSDS一

膜

ゲ ル 電

キ シ ン と して 種 々 の 生 物 活 性 を 有 し て い る. ブ ラ ソ バ メ ラ ・カ タ ラー リス のLPSは1976年 にJohnsonら

に よ り精 製 され,生 化 学 的 検 討 が な

され て い る が8),感 染 の 炎 症 との か か わ り に つ い て 検 討 した 報 告 は少 な い. 我 々 は ブ ラ ソ バ メ ラ ・カ タ ラ ー リス 呼 吸 器 感 染 症 患 者 よ り分 離 した 同菌 のLPSを

精 製 し,SDS-

ゲル 電 気 泳 動 を 行 うと と も に,ヒ

ト血 清 中 の 抗 ブ

ラ ン ハ メ ラLPS-IgG抗

体 に つ い て 検 討 し た.さ

気 泳動 パ ターンを比 較 した報 告 が あ る にす ぎな

ら に,こ の 抗 体 の 抗 菌 活 性 を 明 らか に す る 目的 で,

い.

抗 ブ ラ ソ バ メ ラLPS抗

LPSは

グ ラ ム 陰 性 菌 の 外 膜 の 構 成 成 分 で あ り,

0-chain,Core-01igosaccharide,LipidA部 別 刷 請 求先(〒852)長

分 か

材 料 と方 法 1.使 用 菌 株 と培 養 条 件

崎 市坂 本 町12-4

1987年 以 降,当 施 設 に て 呼 吸 器 感 染 症 患 者 よ り

長 崎 大学 熱 帯 医学 研 究 所 内科 田中 平 成4年6月20日

体 の本菌 の血 清感 受 性 に

与 え る影 響 に つ い て も検 討 した の で 報 告 す る.

宏史

分 離 さ れ た ブ ラ ン ハ メ ラ ・カ タ ラ ー リス を 用 い た.

田中 宏史 他

710

LPSの

精 製 は88-23株,87-94株,

株 を 使 用 し,Brain-Heart 入 れ た2Lフ

infusion

ラ ス コ4個

で振 畳培 養

infusion

agarに

は

て37℃24時

間 抽 出

し た.

1000,Beckman,

て405nmのOptical

を 測 定 し た12).

振 盤 培 養 し た 同 菌 をmid40gphaseで し,生

理 的 食 塩 水 で2回

ナ ー ル 緩 衝 液(以

Johnsonら し た.凍

の 方 法8)に 準 じ てLPSを

抽 出,精

結 乾 燥 し た 菌 体 をEDTAと

リゾチー ム

一 晩 処 理 し た 後,pheno1-hotwater法

粗LPSを

抽 出 し た.遠

dye

3.SDS-ゲ Tsaiら

にて

心 操 作 を 繰 り返 し た 後,プ

ロ ナ ー ゼ 処 理 を し,LPSを carbocyanine

得 た .LPSの

同定 は

assay9)で 行 っ た.

素 を 含 む14% よ う素

気 泳動 し 菌感染

症 患 者 の 血 清 を 用 い て 常 法 通 りPeroxidase標

識

し て 作 成 し た.こ ま で-80℃ 6.ELISA法

収 血 清 は,洗

用 い て,氷

中 で3回

浄 した 菌 体(約 吸収 操 作 を 反 復

れ らの血 清 サ ソ プ ル は 使 用 直 前

に よ る ヒ ト血 清 中 抗LPS-IgG抗

88-23株

れ,同

よ り精 製 し たLPSをcoatingし

crotiter

plateに,1%

tween20で

希 釈 し た 検 体 を 加 え,静 置 後 洗 浄 し た.

次 にAlkaliphosphatase標 体(Sigma,StLouis,MO)お

BSAを

たmi-

加 え たPBS-

識 家 兎 抗 ヒ トIgG抗 よび 基 質 を 用 い て

績

ル 電 気 泳 動(Fig.1A)

ル 電 気 泳 動 を 行 っ た.各

株 のLPS

バ ン ドと して 認 め ら

一 菌 株 に 分 子 量 の 異 な っ たLPSが

て い る こ と が 明 ら か に な っ た.腸

作 られ

内細菌 の グラム

陰 性 菌 で 見 られ る規 則 正 しい 分 子 量 の大 き なバ ン ドは 認 め ら れ ず,ブ LPSはO-chainを

ま た,菌

ラ ソ バ メ ラ ・カ タ ラ ー リ ス の 持 た な い,い

わ ゆ るlipo-

あ る こ と が 示 さ れ た.

株 間 で のLPSの

は 認 め ら れ ず,株

体の検討

影 響 を検 討 し

の ブ ラ ソ ノ・メ ラ ・ カ タ ラ ー リ ス のLPSを

Oligosaccharide(LOS)で

に て 保 存 し た.

述 の方

た.

は 分 子 量 約3KDaの2∼4の

吸 収 血 清 を 用 い た.吸 1010cfu/ml)を

法 で 血 清 感 受 性 に 与 え るLPSの

抽 出 し,SDS-ゲ

常 者 プ ー ル 血 清 に 菌 体 吸 収i操 作 を 行 っ た

れを菌

な る よ う に 加 え,前

に よ る慢 性 気 管 支 炎 の 急 性 増 か ら得 た プ ー ル

な るよ

中 に て20分 間 静 置 し た.こ

出 に 使 用 し た ブ ラ ン ハ メ ラ ・カ

常 者10名

よ り抽 出 精 製 し た

50μg/ml,100μg/mlに

液 に 血 清 濃 度 が20%に

4株

悪 症 例 の 回 復 期 血 清,健

で60

ン トロ ー

加 熱 処 理 にて 非 働 化 した 回復

復 期 患 者 血 清500μ1に87-122株

1.LPSのSDS-ゲ

清 サ ンプル

血 清,健

な る よ う に 加 え,37℃

成

を 使 用 し て イ ム ノ ブ ロ ッ トを 行 っ た.

血 清 は,LPS抽

液 に回 復 期

血 清 感 受 性 に与 え る影 響

体(Tago,Burlingame,CA),

タ ラ リ ー ス88-23株

に,菌

様 に 菌 数 を 測 定 し た.コ

ル と し て,56℃30分

うに 溶 解 し,氷

の 方 法11)に し た が っ て,電

た ゲ ル を ニ ト ロ セ ル ロ ー ス 膜 に 転 写 し,同

5.血

患 者 血 清 を10∼40%に

LPSを,25μg/ml,

ム ノブロ ッ ト

ヤ ギ 抗 ヒ トIgG抗

前述

で 振 畳 し な が ら,経 時 的 に 菌 数

を 定 量 培 養 法 に て 測 定 した.次

分 間 振 盗 後,同

液180μ1に

な る よ う 加 え,GVB2+で

ブ ラ ン ハ メ ラ ・カ タ ラ ー リ ス 呼 吸 器 感 染 症 の 回

染 色 を 行 っ た.

Griffissら

し た.37℃

8.LPSの

の 方 法10)に 準 じ て,4M尿

酸 処 理 後,銀

300μ1と

ラチ ン加 ベ ロ

期 患 者 血 清 あ る い は 吸 収 血 清 を 用 い た.

ル電気泳動

ア ク リル ア ミ ドを 用 い 電 気 泳 動 を 行 い,過

4.イ

製

遠 心集菌

洗 浄 後,ゲ

下GVB2+)に104∼105cfu/mlに

の 回 復 期 血 清 を20%に

精 製 と同定

Density

ラ ン ハ メ ラ ・カ タ ラ ー リス の 血 清 感 受 性13)

な る よ う に 浮 遊 し菌 液 と し た.同

2.LPSの

で4℃

(OD)値 7.ブ

出 に 使 用 し た.88-23株

培 養 し,蒸 留 水 で 洗 浄 集 菌 し,同 様 にLPSを

発 色 さ せ,Autoreader(Biomek PaloAlto,CA)に

1.5Lを

遠 心 集 菌 し,蒸 留 水 で2回

結 乾 燥 し,抽

他 にBrain-heart

87-122

broth

を 使 っ て37℃

した.late-logphaseで 洗 浄 後,凍

87-101株,

泳動 パ ターンに均 一性

に よ っ て 異 な っ たLPSを

て い る こ と が 明 ら か に な っ た.Agarに た88-23株 Brothに

よ り抽 出 し たLPSの て 培 養 したLPSパ

持 っ

て培 養 し

泳 動 パ ター ンは

タ ー ン と 全 く 同 一 で,

培 養 条 件 に よ りパ タ ー ン が 変 化 し な い こ と が 確 認 さ れ た. 感 染 症学 雑 誌

第66巻

第6号

ブ ラ ン ハ メ ラLPSと

Fig. 1

SDS-PAGE

of LPSs from four respiratory

halls strains

(A).

immunoblot

analysis

hamella

lower

immunoblots

抗LPS抗

The

strain of human

respiratory were

numbers infection

711

pathogenic

were

indicated

convalescent

tract

developed

体

sera

against

Branhamella

below

from

each

a patient

Branhamella

with a 1: 1,000 dilution

The

with

LPSs

of human

catarr-

lane.

Bran-

(B). The

convalescent

sera.

A

2.イ

B

ム ノ ブ ロ ッ ト(Fig.1B)

4株 のLPSをSDS-ゲ

Fig.

ル 電 気 泳 動 後,ブ

メ ラ ・カ タ ラ ー リ ス88-23株

ランハ

の 分 離 され た 慢 性 気 管

支 炎 患 者 の 回 復 期 血 清 を 用 い て イ ム ノ ブPッ 行 な う と,4株

と も電 気 泳 動 ゲル と同様 の バ ン ド

が 認 め ら れ た.88-23株 は4株

トを

のLPSを

の感 染 した 患 者 の血 清 中 に

同 様 に 認 識 す るIgGが

産 生 され

2

Anti-Branhamella

convalescent hamella

sera lower

normal

human

human

sera

(•›),

sera

sera; Absorbed

IgG

a

respiratory

patient

tract

and

determined

Convalescent sera

LPS from

by

pooled

of

with

infection,

absorbed

(•œ),

antibody Branpooled

pooled

normal

normal

human

ELISA. Pooled normal

human

sera

(Ģ).

て い る 事 が 示 さ れ た. 3.ヒ

ト血 清 中 の 抗LPs-IgG抗

体(Fig.2)

ヒ ト血 清 サ ン プ ル に お け るO.D.値 と,回 復 期 血 清 は100倍

希 釈 ま で 健 常 者 血 清,吸

血 清 よ り も 高 値 を 示 し た.ま 老 血 清 のO.D.値 か ら,健

を比較 す る

た,10倍

収

希釈 の健常

が 吸 収 血 清 の そ れ よ り高 い こ と

常 者 血 清 中 に も 吸収 可 能 な抗 プ ラ ンバ メ

ラLPSLIgG抗

体 が 存 在 す る こ とが 明 らか で あ

る. 4.ヒ

ト回 復 期 血 清 に よ る 補 体 溶 菌

87-122株

を20%回

復 期 患 者 血 清 とイ ンキ ュ ベ ー

トす る と,7.5×104cfu/mlの 2.5×103cfu/ml,60分 し,以

後 に2×103cfu/mlに

後 増 加 し て120分

な っ た.非

菌 数 が,30分

減 少

後 に は3×104cfu/mlと

働 化 血 清 で は87-122株

ら れ な い こ と か ら,回

後 に

の菌 減 少 は 認 め

復 期 血 清 に お け る菌 数 の減

少 は 補 体 溶 菌 で あ る こ と が 明 ら か と な っ た(Fig. 3A).ま

た,60分

平 成4年6月20日

以 後 は 試 験 管 内 の補 体 消 費 に と も

な い 菌 数 の 増 加 が 認 め ら れ た.一 い て は,20%回

方,88-23株

にお

復 期 血 清 を 加 え た 条 件 で も,非

働

化 血 清 と 同 様 に 菌 数 は 増 加 し た(Fig.3B). 次 に,87-122株 を 加 え て,60分

に 種 々 の濃 度 の 回 復 期 患 者 血 清 後 の 菌 数 の 変 化 を 測 定 し た(Fig.

田中 宏史 他

712

Fig.

3 strain

Susceptibility (B)

to

of

Branhamella

catarrhalis

complement-mediated

Convalescent

sera:

(•œ),

killing

heat-inactivated

87-122 by

20%

convalescent

Antibody-dependent,

strain

by

convalescent

antibody-dependent, homologous

complement-mediated sera

sera:

complement-mediated

killing sera

CS, heat-inactivated

and

88-23

sera.

sera:

(•›).

of Branhamella

of

manner 87-122

strain

catarrhalis (A). by

87-122

Inhibition

addition

of

of

the

(B).

convalescent

sera:

HiCS,

absorbed

convalescent

AbsCS.

A

4A).初

killing

in a concentration-dependent

LPS to 20% convalescent

Convalescent sera:

(A)

B

A

Fig. 4

strain

convalescent

B

め に,5.1×104cfu/mlで

あ った 菌 数 は血

復 期 血 清 を87-122株

で 吸 収 し た40%吸

収血清 では

清10%で1.0×104cfu/ml,20%で4.7×103cfu/ml,

菌 数 は そ れ ぞ れ1.6×105cfu/ml,1.2×105cfu/ml

40%で1.0×103cfu/mlと

と 増 加 し た.従

回 復 期 血 清=濃 度 が 高 い

ほ ど菌 数 は 減 少 し,用 ら れ た.ま

た,こ

量依存性 の補体溶菌 が認め

の 際 の40%非

働 化 血 清 お よ び回

が っ て,87-122株

の回復期血 清 に

よ る殺 菌 は 抗 体 依 存 性 の 補 体 溶 菌 で あ る こ とが 明 ら か と な っ た. 感 染 症学 雑 誌

第66巻

第6号

ブ ラ ン ハ メ ラLPSと

5.LPSの

血 清 感 受 性 に与 え る影 響

静 置 後,前

な る よ うに 加 え,0℃20分

血 清 感 受 性 の 検 討 を 行 っ た(Fig.4B).始

間

の こ と は,ブ

ラ ソバ メ ラ ・カ タ ラ ー

め,

理 血 清 で7.2×103cfu/mlと

減 少 し た.LPSで

理 し た 血 清 で はLPS濃

度25μg/mlで1.2×104

タ ーンの 解 析 に お い

て 我 々 の 泳 動 さ せ るLPS量 た こ と に よ り,よ

あ っ た 菌 数 が60分 後 に は 未 処 前 処

の調 整 が適 切 で あっ

り精 細 な 分 析 が で き た も の と考

え て い る. 多 く の グ ラ ム 陰 性 菌 に お け るLPSの 多 様 で,こ

のLPS抗

Murphyら

あ り,回 復 期 血 清 の87-122株

に

れ ま で に,

は 家 兎 免 疫 血 清 を用 い た イ ム ノ ブ ロ ッ

ト法 に よ り,ブ

ラ ン ハ メ ラ ・カ タ ラ ー リ ス に お い

対 す る 抗 体 依 存 性 の 補 体 溶 菌 は 添 加 し たLPSの

て 少 数 な が らLPSに

=濃度 に 依 存 し て 抑 制 さ れ た .

と を 示 唆 し て い る.最 近,Vaneechoutteは

考

察

基 づ く血 清 型 の 存 在 す る こ

グ ラ ム 陰 性 菌 に は 血 清 中 の 補 体 に よ り溶 菌 す る

ス に お い て,LPSに

基 づ く血 清 型 が 存 在 す る こ と

を,InhibitionELISAを

ル モ ネ ラ14)や緑 膿 菌15)16)で は 補 体 溶 菌 の メ カ ニ ズ

た23).彼

ム がLPSの

つ の 血 清 型 に 分 類 で き た と し て い る.

構 成 との 関 係 に お い て 詳 細 に 検 討 さ

0-chainの

内 細 菌LPSの

もつ 分 子 量 の 大 き な

欠落 あ るいはその構成 が補体 溶菌 に影

響 を 与 え る と さ れ て い る.ま 対 し て も,抗LPS抗

世界 各

地 か ら収 集 した病 原 性 ブ ラ ソバ メ ラ ・カ タ ラー リ

血 清 感 受 性 菌 が 存 在 す る こ と が 知 られ て い る.サ

れ て お り,腸

抗 原性 は

原 に よる血清 型 の決 定 は病

原 性 や 疫 学 的 研 究 に 有 用 で あ る.こ

cfu/ml,50μg/mlで2.7×104cfu/ml,100μg/mlで 5.6×104cfu/mlで

713

リ スLPSのSDS-PAGEパ

述 と 同 様 に 回 復 期 患 者 血 清 濃 度20%で

6.0×104cfu/mlで

体

果 を 得 た.こ

回 復 期 患 者 血 清 に87-122株LPSを25μg/ml,50 μg/ml,100μg/mlに

抗LPS抗

た,血

清抵抗 性株 に

体 に よ る抗 体 依 存 性 補 体 溶

菌 作 用 が 明 ら か に さ れ て い る17). 一方 ,イ ン フ ル エ ン ザ 菌18),百 日咳 菌19),ナ

中93.4%は3

ブ ラ ン ハ メ ラ ・ カ タ ラ ー リス の 血 清 感 受 性 に つ い て は

こ れ

Hernandezら

ま で にChapmanら

とSato-

の 報 告 が あ る24)25).彼 ら に よ れ ば,

本 菌 のLPSがO抗 か わ らず,本

イセ

用 い た 解 析 に よ り報 告 し

ら は こ の 研 究 の 中 で,302株

原 を 欠 くLOSで 菌 の66.7か

ら95.2%は

あ るに も か 健常者血 清 に

よ っ て 溶 菌 の み られ な い 血 清 抵 抗 性 株 で あ っ た と

リ ア 属 で あ る 髄 膜 炎 菌 や 淋 菌20)な ど の 呼 吸 器 や 泌

し て い る.我

尿 器 ・生 殖 器 粘 膜 に 感 染 す る グ ラ ム 陰 性 菌 のLPS

吸 器 感 染 症 患 者 の 回 復 期 血 清 中 に,健

は 一 般 にO-chainを

し て 高 い レ ベ ル の 抗 ブ ラ ソ バ メ ラLPS・IgG抗

欠 如 し て お

oligosaccharide(LOS)と のLOSの

り,lipo-

呼 ば れ て い る.こ

れ ら

構 造 と菌 の血 清 感 受 性 との 関 係 に つ い

て は 詳 細 な 検 討 が あ る18)∼22).し か し な が ら,ナ

イ

々 は ブ ラ ンハ メ ラ ・カ タ ラ ー リス呼

が 存 在 す る こ と をELISAに

常者 に比較 体

よ っ て 確 認 し た.こ

の 抗 ブ ラ ン ハ メ ラ ・ カ タ ラ ー リ スLPS抗 菌 に 対 す る 抗 菌 活 性 に 関 し て は,我

体 の同

々の 知 る 限 り

セ リア属 と同 じ グ ラム陰 性 球 菌 で あ る プ ラ ン ハ メ

で は 報 告 が な い.Chapmanら

ラ ・カ タ ラ ー リ ス のLPSに

関 す る報 告 は 少 な い.

菌 の み ら れ な い 血 清 抵 抗 性 株 が,ブ

Murphyら

電 気 泳 動 パ タ ー ン が,

カ タ ラー リス 呼 吸 器 感 染 症 患 者 の 回 復 期 血 清 の

は 同 菌 のLPSの

外 膜 蛋 白 の そ れ と 同 様 に,菌

株 間 で 殆 ど均 一 で

あ っ た と報 告 し て い る6)7).

IgG抗

は,健 常 者 血 清 で 溶 ラ ンハ メ ラ ・

体 に よ って 抗 体 依 存 性 の溶 菌 を 起 こす こ と

を 報 告 し た24).ま た,こ の 抗 体 依 存 性 補 体 溶 菌 が 補

我 々は 呼 吸器 感 染 患 者 の 喀 疾 よ り分 離 され た 菌

体 のclassical

pathwayに

よ る こ と も明 らか に し

株 か ら 抽 出 し たLPSのSDS一

ゲ ル 電 気 泳 動 を

て い る.本

行 っ た.そ

ナ イ セ リア属 と同

よ っ て 溶 菌 し な い 血 清 抵 抗 性 の ブ ラ ソ バ メ ラ ・カ

の 結 果,同

様 にO-chainの

菌LPSは

欠 如 し たLOSで

に 分 子 量 の 異 な る2∼4の を 確 認 し た.さ

ら に,菌

と を 明 ら か に し,Murphyら 平 成4年6月20日

あ り,同

一 菌株

ノミン ドが 存 在 す る こ と 株 間 に も相 同 性 の な い こ の 報 告 とは 異 な る結

研 究 に お い て も,我

々 は健 常 者 血 清 に

タ ラー リス に は抗 体 依 存 性 補 体 溶 菌 が 認 め られ る 株(87-122株)と な い 株(88-23株)が た,前

抗 体 依 存 性 補 体 溶 菌 が 認 め られ 存 在 す る こ と を 確 認 し た.ま

者 に お い て は87L122株

由来 の ブ ラ ンハ メ

田中 宏史 他

714

ラ ・カ タ ラ ー リスLPSを

回復 期 患 者 血 清 に 添 加

す る こ とで 本 ― 菌 の抗 体 依 存 性補 体 溶 菌 は 抑 制 され た.こ

の こ とは,本 菌 の抗 体 依 存 性 補 体 溶 菌 に本

菌 に 特 異 的 な 抗LPS抗

体 が 関 与 し,さ

10)

らには本

菌 に よ る呼 吸器 感 染 症 に お い て 感 染 防御 的 役 割 を 11)

果 た す こ とを示 唆 す る もの と考 え られ た. 本 論 文 に お い て,我

々 は 呼 吸 器 病 原 性 ブ ラ ソバ

メ ラ ・カ タ ラ ー リスLPSの か に し,さ LPS抗

生 化学 的特 徴 を明 ら

ら に 抗 ブ ラ ソ バ メ ラ ・カ タ ラー リ ス

体 の本 菌呼 吸器 感染 症 にお け る感染 防 御

的 役 割 につ い て 考 察 した.

12)

本 研究 の一 部 は文部 省科 学研 究 費助 成 金(課 題 番号 63480211)に よって行われた. 文 1)

Malmvall, In

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of

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Murphy,

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on

charides

8:

&

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苑 田 文 成,

大 石 和 徳,

忍,

毅,

田 中 宏 史,

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第66巻

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Biochemical Analysis of Lipopolysaccharides from Respiratory Pathogenic Branhamella catarrhalis Strains and the Role of Anti-LPS Antibodies in Branhamella Respiratory Infections Hiroshi

TANAKA, Kazunori OISHI, Fuminari SONODA, Akitaka IWAGAKI, Tsuyoshi NAGATAKE & Keizo MATSUMOTO Department of Internal Medicine, Institute of Tropical Medicine, Nagasaki University

We characterized lipopolysaccharides (LPSs) from respiratory pathogenic Branhamella catarrhalis (BC) strains, and evaluated the protective property of and-BC LPS antibody in BC respiratory infections. LPSs from four strains of BC were lipooligosaccharide having no 0-side chain and a Mrof 3 KDa, as estimated by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE).All of them produced different patterns, showing two to four bands on SDS-PAGE. We found high level of anti-BC IgG antibody in convalescent sera from a patient with BC respiratory tract infection by ELISA. This IgG antibody recognized BC LPSs on Western blots. Two respiratory pathogens of BC (strains; 87-122, 88-23) were tested in a bactericidal assay employing a convalescent sera. 87-122 strain was susceptible to antibody-dependent, complement-mediated killing, while 88-23 strain was resistant. The killing of 87-122 strain was inhibited by addition of the homologous BC LPS to the convalescent sera in a dose-dependent manner. These data support that anti-BC LPS antibody may mediate complement-lysis of some strains of BC, and play a protective role in BC respiratory infections.

平 成4年6月20日